骨質(zhì)疏松模型的實(shí)驗(yàn)服務(wù)介紹：

1 卵巢切除模型

(1)復(fù)制方法  雌性實(shí)驗(yàn)大鼠按40mg/kg體重的劑量經(jīng)腹腔注射麻醉，無(wú)菌下腹部正中切口，鈍性分離腹肌腹膜后進(jìn)腹，絲線結(jié)扎卵巢并摘除。縫合切口前腹腔內(nèi)注射，造模后大鼠常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水和進(jìn)食。

(2)模型特點(diǎn)  卵巢切除后模型大鼠血漿雌激素(E2)含量顯著下降，股骨中點(diǎn)骨皮質(zhì)指數(shù)也明顯下降，骨量和骨質(zhì)量也明顯下降。鏡下病理組織學(xué)觀察顯示，骨組織切片中骨小梁斷裂，排列稀疏，形態(tài)結(jié)構(gòu)完整性差。

(3)比較醫(yī)學(xué)  骨質(zhì)疏松是臨床上老年人常見(jiàn)的疾病之一，婦女絕經(jīng)后好發(fā)此病；隨著絕經(jīng)后時(shí)間延長(zhǎng)，中老年婦女骨質(zhì)疏松發(fā)病率可大幅度上升，表明卵巢分泌的雌激素對(duì)骨質(zhì)疏松的發(fā)生和發(fā)展有重要影響。大鼠去卵巢后，其體內(nèi)雌激素分泌減少，使其對(duì)破骨細(xì)胞的抑制減弱，骨吸收大于骨形成，骨骼呈高轉(zhuǎn)換狀態(tài)，骨量不能保持平衡，導(dǎo)致骨丟失增加。鏡下表現(xiàn)為骨小梁的面積下降、數(shù)量減少、分離度增加。以往研究表明，年齡為3～9月齡區(qū)間的大鼠適合復(fù)制骨質(zhì)疏松模型，尤其是6月齡大鼠已達(dá)峰值骨量。大鼠年齡過(guò)小，機(jī)體內(nèi)因生長(zhǎng)期骨量顯著增長(zhǎng)會(huì)掩蓋去卵巢的骨量丟失；而12個(gè)月齡后大鼠由于開(kāi)始進(jìn)入老齡期，機(jī)體內(nèi)會(huì)出現(xiàn)老年性骨量丟失，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察。到目前為止，采用卵巢切除大鼠復(fù)制的骨質(zhì)疏松模型，是WHO和美國(guó)FDA推薦的研究絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松癥的模型。

2 維甲酸模型

(1)復(fù)制方法  3個(gè)月齡雌性大鼠每天按70mg/kg體重的劑量口服維甲酸，連續(xù)14d，隨后14d維甲酸改為生理鹽水。動(dòng)物常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲水及進(jìn)食。于造模開(kāi)始后第29日處死動(dòng)物，取其脛骨于固定液中固定，常規(guī)脫鈣，石蠟包埋，作連續(xù)切片，光鏡下觀察。

(2)模型特點(diǎn)  口服維甲酸3d后，模型大鼠食量明顯減少；至第14日時(shí)動(dòng)物體重明顯減輕，活動(dòng)減少，并可見(jiàn)拱背豎毛。模型大鼠脛骨近心段松質(zhì)骨(骨小梁)骨量及形態(tài)發(fā)生明顯改變，骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、密度顯著減少，骨小梁間隙增大。模型動(dòng)物骨組織切片形態(tài)計(jì)量結(jié)果顯示，脛骨中段密質(zhì)骨面積百分?jǐn)?shù)也明顯減少，骨髓腔面積百分?jǐn)?shù)增大，反映破骨細(xì)胞活性與功能的骨內(nèi)膜面骨吸收周長(zhǎng)百分?jǐn)?shù)明顯增高。本模型制作方法簡(jiǎn)便，造模時(shí)間短，模型成功率高，動(dòng)物骨質(zhì)疏松表現(xiàn)典型，易于開(kāi)展給藥觀察。

(3)比較醫(yī)學(xué)維甲酸是維生素的衍生物，具有與維生素相似的藥理作用，臨床上主要用于各種皮膚科疾病的治療，但其伴有骨質(zhì)疏松副作用。過(guò)去的研究表明，維甲酸能激活機(jī)體內(nèi)破骨細(xì)胞促進(jìn)骨吸收，但對(duì)成骨細(xì)胞活性無(wú)抑制作用，對(duì)骨形成及骨基質(zhì)的礦化過(guò)程也無(wú)明顯影響，終使機(jī)體內(nèi)骨重建處于骨吸收大于骨形成的負(fù)平衡狀態(tài)，從而導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)骨質(zhì)疏松。本方法建立的骨質(zhì)疏松模型病理形態(tài)改變非常典型，鏡下表現(xiàn)為骨小梁稀疏，骨皮質(zhì)變薄，骨髓腔擴(kuò)大；但由于其造模機(jī)制方面的原因，可引起模型動(dòng)物性腺受損及脾臟、腎上腺發(fā)生代償性肥大，所以其在研究的實(shí)用性方面不如卵巢切除方法建立的骨質(zhì)疏松模型。

分子實(shí)驗(yàn)平臺(tái)：高效運(yùn)作了qRT-PCR、Western blot、雙向電泳技術(shù)、分子克隆與質(zhì)粒構(gòu)建、流式細(xì)胞儀檢測(cè)、免疫共沉淀、染色質(zhì)免疫共沉淀、RNA免疫沉淀、凝膠電泳遷移實(shí)驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定、外泌體抽提及鑒定等實(shí)驗(yàn)。

基因組學(xué)平臺(tái)：可以完成甲基化檢測(cè)、基因芯片分析、高通量測(cè)序等實(shí)驗(yàn)。

蛋白組學(xué)平臺(tái)：能實(shí)現(xiàn)LC-MS、ITRAQ、蛋白質(zhì)修飾分析等重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目。

病理學(xué)平臺(tái)：涉及免疫熒光染色、免疫組織化學(xué)染色、HE染色、特殊染色等實(shí)驗(yàn)。

臨床前CRO服務(wù)：主要提供呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)性疾病的藥效學(xué)評(píng)價(jià)服務(wù)，包括靶點(diǎn)驗(yàn)證、體內(nèi)外模型的構(gòu)建、藥物篩選、藥物分析、藥效性評(píng)價(jià)、藥代

動(dòng)力學(xué)和藥理學(xué)研究以及院內(nèi)制劑研發(fā)等。

項(xiàng)目轉(zhuǎn)化服務(wù)：助力客戶進(jìn)行方案設(shè)計(jì)、聯(lián)合課題申報(bào)、藥物項(xiàng)目引進(jìn)和孵化，解決客戶對(duì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái)、專業(yè)人和融資的需求。